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灵芝体内抗肿瘤作用与免疫调节作用

     20世纪70年代,日本学者最先发现灵芝水提取物和灵芝多糖体内给药对动物移植性肿瘤有显着的抑制作用,并提出灵芝的抗肿瘤作用是“宿主中介性的”,可能是通过增强机体的免疫功能而实现的。经一系列研究证明:灵芝水提取物及其所含多糖肽灌胃可抑制小鼠移植性肿瘤S180、人肺癌(PG)、Lewis肺癌的生长,但直接加到体外培养的S180或人白血病细胞的培养液中,对肿瘤细胞生长无抑制作用。提示灵芝在体内抑制肿瘤生长的作用确实是“宿主中介性的”,增强机体的抗肿瘤免疫力可能是其中重要的一环。

     随后的研究证明,灵芝多糖肽可直接作用于单核巨噬细胞、树突状细胞和细胞毒T-细胞,增强其功能。促进TNF-αmRNA和IFN-γmRNA表达,增加TNF-α和IFN-γ生成,也促进IL-1和IL-6等细胞因子生成,增强细胞因子的活性,从而抑制肿瘤细胞增殖,诱导肿瘤细胞凋亡,最终杀死肿瘤细胞。

      在小鼠骨髓来源的树突状细胞(DC)体外培养体系中,加入灵芝多糖Gl-PS(0.8、3.2或12.8μg/ml)可明显促进DC表面DC11c及I-A/I-E分子的共表达、明显增加IL-12 40亚基mRNA和蛋白表达、促进DC诱导的混合淋巴反应(MLC),表明灵芝多糖能促进DC的成熟、分化和功能。在经P815肿瘤细胞裂解物冲击致敏小鼠骨髓来源的DC诱导产生的特异性细胞毒T淋巴细胞(CTL)模型,在冲击致敏阶段与不同浓度的灵芝多糖(Gl-PS)共培养,收集CTL及细胞培养上清液,以释放入CTL与P815肿瘤细胞共培养体系细胞培养上清液中的乳酸脱氢酶(LDH)活性代表CTL的特异性杀伤活性;同时用RT-PCR法检测CTL中IFN-γ及颗粒酶B的mRNA表达;用ELISA法检测细胞培养上清液中IFN-γ蛋白含量;用Western Blot法检测CTL表达的颗粒酶B的蛋白含量。  

      结果显示:当DC经P815肿瘤细胞冻融抗原冲击致敏后,其诱导产生的CTL对P815肿瘤细胞具有杀伤作用,灵芝多糖(Gl-PS)(0.8、3.2或12.8μg/ml)可增强此作用,使释放入培养上清液中的LDH活性显着增强。进一步研究发现,同上浓度的灵芝多糖可明显增加DC诱导CTL的IFN-γ蛋白含量增加。上述浓度的灵芝多糖还可明显增加DC诱导的CTL的颗粒酶BmRNA及蛋白表达。这些结果提示,灵芝多糖在DC成熟阶段,增强DC对肿瘤抗原的捕获、处理、递呈能力,增强DC诱导的特异性CTL的细胞毒活性。而灵芝多糖促进活化CTL的IFN-γ mRNA转录及蛋白表达,使IFN-γ生成增加,后者通过其直接和间接作用发挥抑瘤作用。颗粒酶参与促进CTL及NK细胞介导的细胞凋亡。颗粒酶家族中,以颗粒酶B功能最强。灵芝多糖促进CTL的颗粒酶B mRNA和蛋白质表达,与其增强CTL的细胞毒活性有关。


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